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4精液的检查、稀释、分装与保存 精液的品质检查、稀释处理和分装保存，均在精液处理室进行，进入实验室时必须穿白大褂，手用酒精棉消毒后方可进行精液的处理。 4.1精液品质的检查 从采精室递过来的精液，要马上进行鉴定，以便决定可否留用，从而保证母猪的受胎率和产仔数。检查精液的主要指标有如下几个：精液量、颜色、气味、精子密度、精子活力、酸碱度、黏稠度、畸形精子率等。每份经过检查的公猪精液，都要有一份详细的检查记录，以备对比及总结。 检查前，将精液转移到在37℃水浴锅内预热的烧杯中，或直接将精液袋放入37℃水浴锅内保温，以免因温度降低而影响精子活力。整个检查过程要迅速、准确，一般在5—10 min内完成。 4.1.1精液量。后备公猪的射精量一般为l50~200mL，成年公猪为200~300 mL，有的高达700~800 mL。精液量的多少因品种、品系、年龄、采精间隔、气候和饲养管理水平等不同而不同。 4.1.2颜色。正常精液的颜色为乳白色或灰白色，精子的密度愈大，颜色愈白；密度越小，则颜色越淡。如果精液颜色有异常，则说明精液不纯或公猪有生殖道病变：如呈绿色或黄绿色时则可能混有化脓性物质；呈红色时则可能混有新鲜血液：呈褐色或暗褐色时则可能混有陈旧血液及组织细胞：呈淡黄色时则可能混有尿液等。凡发现颜色有异常的精液，均应弃去不用，同时对公猪进行对症处理、治疗。 4.1.3气味。正常的公猪精液含有公猪精液特有的微腥味，这种腥味不同于鱼类的腥味，没有腐败恶臭的气味。有特殊臭味的精液一般混有尿液或其它异物，一旦发现，不应留用，并检查采精时是否有失误，以便下次纠正做法。 4.1.4酸碱度。可用pH试纸进行测定。公猪精液一般呈弱碱性或中性，其酸碱度与精子密度呈负相关，pH越接近中性或弱酸性，则精子密度越大，但过酸或过碱都会影响精子的活力。 4.1.5黏稠度。精液黏稠度的高低，与精子密度密切相关：精子密度大的精液，则黏稠度也高；精子密度小的精液，黏稠度也低。 4.1.6精子密度。指每毫升精液中含有的精子量，它是用来确定精液稀释倍数的重要依据。正常公猪的精子密度为2.0~3.0亿个精子/mL，有的高达5.0亿个精子/mL。精子密度的检查方法有以下两种。 (1)显微镜检查法(估测法)。此法简便易行，成本低，但不够准确。在400倍视野下观察精子的密度，判断标准如下：A)密：精子之间的空隙小于1个精子；每毫升原精液一般含有精子3-4亿个，最多可达5亿个以上。B)中等：精子之间的空隙可容纳1。2个精子，每毫升原精液一般含有精子l.5—3亿个。C)稀：精子之间的空隙可容纳数个精子，每毫升原精液一般只有精子l亿个左右。 (2)用精子密度仪计算精子密度。特点：极为方便，检查时间短，准确率高，使用寿命长，但价格较高。它有两种类型：一种是精子密度仪，它是将原精液滴一滴在一个一次性的特制塑料板上，然后通过仪器直接测量精子的密度：另一种是利用光电比色法，以精子对光通透性差为依据，用分光光度计读出一个数值，然后再根据事先准备好的标准曲线确定精子的密度。这两种类型都有一个缺点，就是会将精液中的异物当成精子来计算。 4.1.7精子活力。精子活力的高低关系到与配母猪受胎率和产仔数的高低，因此，每次采精后及使用精液前，都要进行精子活力的检查，以便确定精液能否使用及如何正确使用。 精子活力的检查必须用37℃左右的保温板，以维持精子的温度需要。一般先将载玻片和盖玻片放在保温板上预热至37℃左右后，再滴上精液。在显微镜下进行观察。若有条件，可在显微镜上配置一套摄像显示仪，将精子放大到电脑屏幕上进行观察。在我国，精子活力评定一般采用l0级制，即在显微镜下观察一个视野内的精子运动，若全部直线运动，则为1.0级：有90%的精子呈直线运动，则活力为0.9；有80%的精子呈直线运动，则活力为0.8：依次类推。新鲜精液的精子活力以高于0.7为正常：使用稀释后的精液，当活力低于0.6时，则应弃去不用。 4.1.8畸形精子率。畸形精子指断尾、断头、有原生质、头大、双头、双尾、折尾等精子。一般不能直线运动。不仅受精能力较差，而且影响精子的密度。若通过摄像显示仪观察，则很容易区分。若用普通显微镜观察，则需染色；若用位相差显微镜，则可直接观察。公猪的畸形精子率一般不能超过20%，否则应弃用。 4.2精液的稀释 经过检查的精液，差的弃去，留品质好的进行稀释处理。优良公猪利用率的高低，关键在于精液处理保存的好坏。处理后的精液和原精液相比，一是扩大了与配母猪头数，能迅速将优秀公猪基因推广开来；二是增加了精液的营养成分，有利于精液的保存：三是便于运输。 处理精液必须在恒温的环境中进行，检查品质后的精液和稀释液都要在37℃恒温下预热，二者温度上下不能超过l℃，否则会对精子造成应激。处理时，严禁太阳光直射精液，因阳光对精子有一定的杀伤力。所用的稀释水应是经检查有害物质不超标的纯净水或蒸馏水，最好采用双蒸水。稀释液一般要在采精前准备好，并进行预热。 4.2.1稀释液的准备。稀释剂有多种配方，分短期保存和长期保存等。短效稀释剂一般要在3 d内使用，否则效果较差。长效稀释剂可保存5~8 d，但配种受胎率及母猪产仔数不及短效稀释剂。稀释剂在采精前用双蒸水进行混合溶化，可用磁力搅拌器以促进溶解。然后，在水浴锅内进行预热，备用，也可配制好后先贮存，但要在24 h内使用完。抗生素应在稀释精液时加入到稀释液，加得太早易失效。 4.2.2精液稀释方法。稀释前，应对自己所需精液的稀释头份进行确定。稀释头份可按如下方法进行计算：人工授精的正常剂量一般为30~50亿个精子/头份，体积为80-100 mL，我国一般采用每头份(100 ml)40亿个精子左右。正常的公猪精液，假如密度为3亿个/mL，精子活力0.9，畸形精予率5%，采精量为150 mL，并计划稀释后每头份密度为40亿"个/l00 mL，则此公猪精液可稀释150x3x0.9x95%/40：9.6头份，即需加9.6x100—150=810 mL稀释液，配成960 mL稀释精液。 按照l：l稀释法，操作如下：150 mL原精液加入150 mL稀释液形成300 mL稀释精液，300 mL稀释精液再加入300 mL稀释液形成600 mL稀释精液，最后按照精液制造量再加入360 mL稀释液最终形成960 mL稀释精液。注意每次稀释后，需要检查精子活力，并于l5~20 min后进行第2次稀释。 根据计算好的稀释头份，用量杯量取稀释液的体积；或简单一点，按l mL精液或稀释液约等于lg，用精密电子天平直接称量。 稀释时，将稀释液顺着盛放精液的量杯壁慢慢注入精液，并不断用玻璃棒搅拌，以促进其混合均匀；不能将稀释液直接倒入精液，因精子需要一个适应过程。 精液稀释的成败，与所用仪器的清洁卫生程度有很大关系。所有使用过的烧杯、玻璃棒及温度计，都要及时用蒸馏水洗涤，并进行高温消毒，这是确保稀释后的精液适期保存、利用的重要条件。 4.3稀释后精液的分装 精液的分装，有瓶装和袋装两种，装精液用的瓶子和袋子均为对精子无毒害作用的塑料制品。瓶装的精液分装时简单方便，易于操作，但输精时需人为挤、压或瓶底开口，因瓶子有一定的固体形态；袋装的精液分装一般需要专门的精液分装机，用机械分装、封l：3，输精时因其较软，一般不需人为挤压。瓶子上面一般均有刻度，最大刻度为100 mL，袋子一般为80 mL。 分装后的精液，要逐个粘贴标签，一般同一个品种贴同一种颜色的标签，便于区分。注意要在上面标明公猪耳号、采精处理时间、稀释后精子密度、经手人等，并将以上各项登记到记录本上，以备查验。4.4稀释后精液的保存 分装后的精液不能立即放入l7℃左右的恒温冰箱内，应先留在冰箱外l h左右，让其温度慢慢下降，以免因温度下降过快而刺激精子，造成死精子增多等。放入冰箱时，不同品种的公猪精液应分开放置，否则匆忙中容易拿错精液。不论是瓶装的还是袋装的，均应平放，并可叠放。从放入冰箱开始，每隔12 h，要摇匀1次精液，因精子放置时间过长，会大部分沉淀。对于一般猪场来说，可在早晨上班后、下午下班前各摇匀1次。为了便于监督，每次摇动都应有摇动时间和人员的记录。 保存过程中，一定要时刻注意冰箱内温度计的变化，以免因意想不到的原因造成电压不稳而导致温度升高或降低。精液的运输过程中，要尽量保持17℃的恒温环境。精液制造完成后，要做好详细的记录，包括采精日期、公猪号、公猪品种、采精员、采精量、色泽、气味、pH、活力、密度、畸形精子率、总精子数、稀释后总量、稀释液量、头份数、检验员、备注。 |
